細胞STR鑒定應用於生物醫學研究領域的哺乳動物細胞被錯誤鑒定和交叉汙染的問題,一直是一個普遍存在的突出問題。
據統計,國外實驗室有20%左右的細胞株被錯誤鑒定和交叉汙染,NIH和ATCC近兩年都對此發出呼籲,要求研究者對細胞進行鑒定。近年來,大量研究表明STR基因分型方法是進行細胞交叉汙染和性質鑒定的最有效和準確的方法之一,STR基因分型應用於細胞鑒定已被ATCC等機構強烈推薦。美國的ATCC細胞庫、德國的DSMZ細胞庫以及日本的JCRB細胞庫等為STR分型提供了各細胞株的數據供比對。
STR(Short Tandem Repeat,短串聯重複序列)基因位點由長度為3-7個堿基對的短串連重複序列組成,這些重複序列廣泛存在於人類基因組中,可作為高度多態性標記,被稱為細胞的DNA指紋,其可通過PCR(聚合酶鏈式反應)來檢測。STR基因座位上的等位基因可通過擴增區域內重複序列的拷貝數的不同來區分,在毛細管電泳分離之後可通過熒光檢測來識別。隨後通過一定的計算方法,即可根據所得的STR分型結果與專業的細胞STR數據庫比對從而推算出樣品所屬的細胞係或可能的交叉汙染的細胞係名稱。
我們為進一步提高鑒定的分辨率,除了包含ATCC檢測的8個STR和1個性別決定位點Amelogenin外,另新增了12個高度多態性位點,共檢測21個STR位點。
細胞樣本:一瓶活細胞 ,細胞數≥106 cells ;凍存細胞,細胞數≥106 cells ;細胞沉澱,細胞數≥106 cells
DNA樣本:OD 260/OD 280=1.8-2.0 ; DNA濃度≥50 ng /μL , DNA體積≥20 μL (凍存細胞,細胞沉澱,DNA樣本,請低溫運輸! )
客戶需要提供細胞樣品,管壁標記清楚細胞的名稱,數量較多時要標好標注,並附送鑒清單。
每次鑒定的周期為1周,具體細節請與相關 客服人員溝通好。
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